Imported Lassa Fever in Germany Molecular Characterization of a New Lassa Virus Strain. Vol. 6, No. 5, October 2000. .. ‼️Recientemente, se mapearon varios epítopos reconocidos por los clones de células T CD4+ específicos de Lassa NP de una persona (32). La mayoría de ellos se conservan en al menos dos de las tres cepas de Lassa (Josiah, Nigeria y AV). ‼️‼️El número relativamente grande de epítopos de células T reconocidos, así como su conservación parcial, sugiere un nivel de reactividad cruzada de células T que podría ser suficiente para la protección cruzada contra cepas heterólogas después de la inmunización con vacunas basadas en NP... experimentos con vacunas basadas en GPC de Lassa, que indican protección cruzada mediada por células T CD4+ incluso contra LCMV (43). Uso de la nueva cepa del virus Lassa como virus de exposición heterólogo después de la inmunización con vacunas recombinantes, así como el uso de sus proteínas en ensayos in vitro para estudiar la reactividad cruzada de células T..

Fiebre de Lassa importada en Alemania: Caracterización Molecular de una Nueva Cepa de Virus Lassa - Volumen 6, Número 5—Octubre 2000 - Revista de Enfermedades Infecciosas Emergentes - CDC
Origen y Aislamiento de la Nueva Cepa del Virus Lassa

... Detección de AV de Lassa en células Vero infectadas. (A) Inmunofluorescencia con anticuerpo monoclonal específico de NP L2F1 40 horas después prácticamente todas las células se infectaron en cultivos inyectados con 0,1 ml de ... El aislamiento de un virus Lassa se confirmó adicionalmente mediante análisis de inmunotransferencia de células infectadas con la cepa AV utilizando anticuerpo específico de proteína Z del virus Lassa. Se demostró una proteína Z de 11 kDa (Figura 2B) como se ha detectado recientemente en células infectadas con Lassa Josiah (24).
Conclusiones El alto grado de variabilidad plantea problemas para el diseño de PCR de diagnóstico y cebadores de secuenciación. La mayoría de nuestros cebadores de secuenciación que fueron diseñados sobre la base de secuencias de la cepa Josiah y Nigeria no lograron unirse a la nueva cepa como resultado de varias mutaciones en sus sitios de unión. Además, el sitio de unión del cebador 80F2 (18), que había sido diseñado para el diagnóstico sobre la base de nueve secuencias de Lassa, contenía tres mutaciones. Como afectaron solo a la mitad 5' del cebador, el rendimiento de la PCR no se redujo seriamente, lo que confirma su utilidad para fines de diagnóstico. La RT-PCR de ARN S de longitud completa puede ser una alternativa para el diagnóstico debido a sus sitios de unión de cebadores altamente conservados, aunque su sensibilidad puede ser algo menor.
El análisis filogenético mostró diferencias menores en la topología de árboles de los arenavirus del Viejo Mundo en comparación con el análisis anterior (11). En nuestro análisis, los virus Mobala y Mopeia se colocaron en estrecha relación, mientras que el estudio anterior indicó que Mobala está más estrechamente relacionado con el virus Lassa. Sin embargo, en ambos estudios, el soporte de bootstrap fue bajo y la topología del árbol dependía de la inclusión de cambios en la tercera posición del codón (11). La colocación de Lassa Nigeria, Josiah y LP difería en ambos estudios de manera similar. Es posible que se requiera un análisis de secuencias adicionales para dilucidar la relación filogenética exacta entre los virus Mopeia, Mobala y Lassa, así como entre las cepas del virus Lassa Nigeria, Josiah y LP.
El desarrollo de una vacuna contra el virus Lassa es un objetivo principal de la investigación (39). La inmunidad protectora se logra en animales mediante la vacunación con lassa NP o virus vaccinia que expresa GPC y parece estar mediada por la respuesta de las células T (40-42). Sin embargo, aún no se ha estudiado si una vacuna recombinante basada en una sola proteína Lassa de una cepa específica protege de forma cruzada contra cepas heterólogas de Lassa. ‼️Recientemente, se mapearon varios epítopos reconocidos por los clones de células T CD4+ específicos de Lassa NP de una persona (32). La mayoría de ellos se conservan en al menos dos de las tres cepas de Lassa (Josiah, Nigeria y AV). ‼️‼️El número relativamente grande de epítopos de células T reconocidos, así como su conservación parcial, sugiere un nivel de reactividad cruzada de células T que podría ser suficiente para la protección cruzada contra cepas heterólogas después de la inmunización con vacunas basadas en NP. ‼️Esta opinión está respaldada por experimentos con vacunas basadas en GPC de Lassa, ‼️que indican protección cruzada mediada por células T CD4+ incluso contra LCMV (43). Uso de la nueva cepa del virus Lassa como virus de exposición heterólogo después de la inmunización con vacunas recombinantes, así como el uso de sus proteínas en ensayos in vitro para estudiar la reactividad cruzada de células T, ‼️puede mejorar nuestra comprensión de la inmunidad de protección cruzada específica del virus de Lassa. Descarga pdf??
https://wwwnc.cdc.gov/eid/article/6/10/00-0504_article

☝? Protección cruzada contra el virus de la coriomeningitis linfocítica mediada por un clon de células T CD4+ específico para un epítopo de glicoproteína de envoltura del virus de Lassa. Junio 1993. Se aislaron varios clones de células T CD4+ específicos para el péptido 403-417 y se encontró que producían interferón gamma en respuesta tanto al péptido como al LCMV. Uno de estos clones, el C9, fue seleccionado para su posterior estudio. C9 lisó células diana portadoras de I-AK y, cuando se transfirió adoptivamente a ratones C3H/HeJ, fue capaz de mediar tanto en una reacción de hipersensibilidad retardada específica del péptido como en la resistencia al desafío letal de LCMV. Estos hallazgos colectivos demuestran, por primera vez, que las células T CD4+ pueden desempeñar un papel importante en la inmunidad de protección cruzada específica de arenavirus. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC237696/

Protección cruzada contra el virus de la coriomeningitis linfocítica mediada por un clon de células T CD4+ específico para un epítopo de glicoproteína de envoltura del virus Lassa. - PMC Abstracto

Virus vacunal recombinante que expresa el precursor de glicoproteína de la envoltura del virus Lassa (LV), V-LSGPC, se utilizó para estudiar la base de la inmunidad de protección cruzada inducida por LV contra el virus de la coriomeningitis linfocítica del arenavirus estrechamente relacionado (LCMV). Los ratones C3H/HeJ cebados con V-LSGPC no desarrollaron anticuerpos circulantes ni células T citotóxicas CD8+ específicas para LCMV, pero resistieron un desafío de LCMV normalmente letal. Las células de bazo de tales ratones dieron una respuesta proliferativa al LCMV in vitro que era inhibible por el anticuerpo anti-CD4. Los péptidos sintéticos correspondientes a los sitios de células T predichos comunes al precursor de la glicoproteína de la envoltura (GP-C) de LV y el de LCMV se utilizaron para mapear la especificidad de la respuesta proliferativa a un epítopo localizado entre los aminoácidos 403 y 417 de LV GP-C. ‼️Se aislaron varios clones de células T CD4+ específicos para el péptido 403-417 y se descubrió que producían interferón gamma en respuesta tanto al péptido como al LCMV.‼️ Uno de estos clones, C9, se seleccionó para estudio adicional. C9 lisó las células diana portadoras de I-AK, y cuando se transfirió adoptivamente a ratones C3H/HeJ, fue capaz de mediar tanto una reacción de hipersensibilidad retardada específica del péptido como la resistencia a la exposición letal al LCMV. ‼️Estos hallazgos colectivos demuestran, por primera vez, que las células T CD4+ pueden desempeñar un papel importante en la inmunidad de protección cruzada específica del arenavirus.‼️ fue capaz de mediar tanto una reacción de hipersensibilidad retardada específica del péptido como la resistencia a la exposición letal al LCMV.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC237696/

PubMed Central (PMC)

Cross-protection against lymphocytic choriomeningitis virus mediated by a CD4+ T-cell clone specific for an envelope glycoprotein…

Recombinant vaccinia virus expressing the Lassa virus (LV) envelope glycoprotein precursor, V-LSGPC, was used to study the basis of LV-induced cross-protective immunity against the closely related arenavirus lymphocytic choriomeningitis virus (LCMV). ...

☝? Caracterización de clones de células T CD4 humanas reconociendo epítopos conservados y variables de la nucleoproteína del virus de Lassa+. Marzo 2000. ‼️El grado de conservación de los epítopos inmuno dominantes de las células T y/o las regiones de unión al MHC entre diferentes cepas de virus podría ser fundamental para la inmunidad de protección cruzada en una infección controlada predominantemente por células T, ‼️como la fiebre de Lassa. Por lo tanto, será importante analizar los epítopos de las células T CD4 en el NP y las glicoproteínas del virus de Lassa presentadas por moléculas comunes del MHC-II. Además, su grado de variación en las variantes naturales del virus de Lassa debería influir en el diseño de vacunas recombinantes contra la fiebre de Lassa.+++ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC111699/

Caracterización de Clones de Células T CD4+ Humanos Reconociendo Epítopos Conservados y Variables de la Nucleoproteína del Virus Lassa - PMC
Obviamente, el virus de Lassa y el LCMV inducen respuestas inmunitarias similares, predominantemente dependientes de las células T...
Los arenavirus tienden a mostrar una variación considerable de sus secuencias de nucleótidos y aminoácidos en la naturaleza. Hasta la fecha, solo se han secuenciado completamente los genes estructurales de dos cepas del virus de Lassa. Se demostró que los aminoácidos de las proteínas estructurales de la cepa JOS de Sierra Leona y de la cepa NIG de Nigeria difieren aproximadamente en un 15%. Una comparación de fragmentos de PCR generados a partir de varios aislados de Sierra Leona y Liberia mostró variaciones de aminoácidos de hasta el 6,3% en la glicoproteína (J. C. S. Clegg, S. M. Wilson y G. Lloyd, Abstr. 8th Int. Conf. Negative Strand Viruses, abstr. 143, p. 111), y recientemente hemos amplificado una secuencia viral de un paciente con fiebre de Lassa en la República de Guinea que variaba de las cepas JOS y NIG en más de un 10% en la secuencia de aminoácidos de la NP (27). ‼️Por lo tanto, la investigación del potencial de protección cruzada de las respuestas de las células T frente a diferentes cepas del virus de Lassa‼️ es importante para comprender la historia natural de la enfermedad y para evaluar estrategias para diseñar vacunas recombinantes. Con este fin, investigamos la reactividad cruzada de nuestro TCC con los epítopos homólogos de la cepa de Lassa NIG y el arenavirus MOP, presumiblemente apatógeno de África oriental. Pudimos realizar estos experimentos con tres TCC, de los cuales dos fueron estimulados por los mismos péptidos JOS superpuestos (TCC 141 y 148). Otros experimentos indican que estos clones probablemente no reconocen el mismo epítopo, porque un clon (TCC 141) mostró una proliferación reducida cuando se estimuló con los péptidos homólogos de NIG y MOP, mientras que el otro (TCC 148) no reaccionó. La reactividad de este clon podría restaurarse parcialmente con un péptido superpuesto (Fig. ​(Fig.4A;4Un; P22-hom). Este último hallazgo podría deberse al hecho de que los aminoácidos que contribuyen al contacto entre el homólogo de P22 y la molécula MHC-II son diferentes de los que contribuyen al contacto entre el homólogo de P21 y la molécula MHC-II, más que a que se ofrezca un segundo epítopo de células T al receptor de células T. El tercer clon (TCC 135) también mostró una reactividad casi abolida con los péptidos homólogos NIG y MOP, con solo un intercambio de aminoácidos en el epítopo putativo para el homólogo P34 de MOP (Fig. ​(Fig.4B;4B; Higo. ​Fig.3).3). Se han reportado hallazgos similares a los nuestros para otros virus. ‼️En la infección por el virus del dengue, los TCC CD4 citotóxicos fueron de reacción cruzada contra tres serotipos de dengue, debido a la perfecta conservación de sus epítopos.‼️ Sin embargo, dos sustituciones de aminoácidos en el epítopo homólogo del cuarto serotipo abolieron la reactividad de los clones (14). En la infección crónica por el virus de la hepatitis C, la reactividad del CTC CD4 se redujo en gran medida después de mutaciones puntuales de un solo aminoácido en los epítopos de la proteína no estructural NS3, que se observó que ocurrían como posibles variantes de escape de las células T durante un período de tiempo (31). ‼️El grado de conservación de los epítopos inmuno dominantes de las células T y/o las regiones de unión al MHC entre diferentes cepas de virus podría ser fundamental para la inmunidad de protección cruzada en una infección controlada predominantemente por células T, como la fiebre de Lassa. ‼️ Por lo tanto, será importante analizar los epítopos de las células T CD4 en el NP y las glicoproteínas del virus de Lassa presentadas por moléculas comunes del MHC-II. Además, su grado de variación en las variantes naturales del virus de Lassa debería influir en el diseño de vacunas recombinantes contra la fiebre de Lassa.+++ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC111699/

Esteroles de Pneumocystis carinii hominis Organismos Aislados de Pulmones Humanos
...Neumocistis carinii es un microbio eucariota oportunista que no causa enfermedad potencialmente mortal entre individuos inmunocompetentes, pero puede causar un tipo de neumonitis (P. carinii neumonía o PCP) en individuos inmunocomprometidos o inmunodeficientes. PCP es una importante causa de mortalidad y morbilidad en pacientes con SIDA y P. carini también puede causar neumonitis en los receptores de trasplantes órganos y pacientes sometidos a terapia contra el cáncer. P. carinii es un organismo ubicuo al que las poblaciones humanas están constantemente expuesto; la mayoría de las personas prueban seropositivo a P. carinii como niños pequeños (22, 23, 29).
El organismo tiene afinidades filogenéticas cercanas con hongos pero exhibe características que son diferentes a las que tipifican la mayoría de los hongos. Un ejemplo es su resistencia a los agentes antifúngicos comunes. Antibióticos de polieno como la anfotericina B se une al ergosterol en membranas fúngicas, dando como resultado el formación de poros grandes y la disipación de gradientes iónicos, por lo tanto matando la celda. A diferencia del caso en la mayoría de los patógenos fúngicos de mamíferos, ergosterol no se detectó en P. carinii, proporcionando así un explicación de la ineficacia de la anfotericina B frente a PCP (3). Sin embargo, ahora está bien documentado que P. carini carini sintetiza un número de esteroles que son distintos de los encontrados en el huésped mamífero (11, 13, 15, 16, 17). El P. cariniilos esteroles específicos incluyen varios 7 24-alquilesteroles (C28 y C29 esteroles).
...
Los perfiles de esterol en P. carinii hominis. 

En nuestro estudio, el colesterol constituyó el 78% de los esteroles totales en recién aislados P. carinii carinii derivado de ratas (17). La mayoría, si no todo, el colesterol en el organismo se elimina del huésped y se presume que forma la mayor parte de la bicapa lipídica de la patogeniza las membranas. Muchos organismos toman nutrientes de sus ambientes; los parásitos son particularmente eficientes en la eliminación del huésped moléculas e incorporándolas en sus estructuras celulares. En algunos parásitos donde el colesterol satisface completamente lo estructural requisitos de sus funciones de membrana, el colesterol puede ser el único esterol detectado. En otros parásitos, a pesar de la eliminación y incorporar colesterol en la fase a granel de lípidos de membrana los compuestos de esterol distintivos de las bicapas pueden necesitar sintetizarse si el colesterol no cumple con los requisitos estructurales precisos para funciones especializadas de la membrana (por ejemplo, actividad enzimática). ...Este es el primer informe de la composición de esteroles de Neumocistis organismos aislados de material humano. Estos organismos derivados de humanos y los aislados de ratas inmunodeprimidas con corticosteroides (3, 15, 17, 27) tener en varios comunes ⁇ 7 24-alquilsteroles, que no se encuentran en cualquier otro microbio que infecte los pulmones humanos. Por lo tanto, aunque los esteroles tienen se ha analizado en organismos solo de ratas y humanos, es probable que estos esteroles se encuentran en todas las cepas de Neumocistis proliferando en otros mamíferos. Por otro lado, el neumocisterol puede representar una diferencia bioquímica entre diferentes genéticos poblaciones de Neumocistisorganismos proliferando en los seres humanos, y por lo tanto no se puede descartar que este esterol de forma natural ocurre en organismos que proliferan en otras especies hospedadoras de mamíferos.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC95807/

Patógenos y parásitos: estrategias y desafíos enero de 2000 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1312209/

Patógenos y parásitos: estrategias y desafíos. enero de 2000 Parte 9 Bioterrorismo
De repente (y tardíamente) el bioterrorismo ha tomado el centro de la escena. La amenaza de la guerra biológica tiene décadas de antigüedad, y las armas biológicas son potencialmente más devastadoras que las armas nucleares. La viruela o la peste pueden saltar sobre grandes áreas geográficas como un incendio biológico en la corona, y los suministros actuales de antibióticos y vacunas son inadecuados para apagar la conflagración. Según Ken Alibek, un experto en el programa de armas biológicas de Rusia que desertó a los EE.UU., al menos 70 tipos diferentes de bacterias, virus, rickettsias y hongos pueden convertirse en armas (48). Un panel de expertos enumeró la viruela, la peste, el ántrax y el botulismo como las opciones más probables para las armas biológicas (49). Durante décadas, el programa ruso produjo agentes genéticamente alterados que eran inusualmente virulentos y modificados antigénicamente para que las vacunas tradicionales no proporcionaran protección. Un gen de la toxina de la mielina, que destruye la vaina de mielina alrededor de las neuronas, fue introducido con éxito por científicos rusos en Yersinia pestis, el agente de la peste. También se pudo haber diseñado una quimera de ébola y viruela, uniendo la virulencia de ambos agentes con la propagación de la viruela en el aire.

El bioterrorismo y las enfermedades infecciosas emergentes exigen una nueva conciencia de la epidemiología de las enfermedades infecciosas, incluida la forma en que evolucionan los patógenos y los parásitos y cómo podemos estar subvirtiendo el proceso evolutivo mediante la ingeniería genética. La virulencia inducida en el laboratorio y la propagación epidémica por diseño humano son nuevos tipos de amenazas sin parangón en el pasado evolutivo.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1312209/

PubMed Central (PMC)

Pathogens and parasites: strategies and challenges

The threat of emerging infections grows with the swelling tide of the human population and the continued disregard for the health of the environment. One of our most urgent challenges in public health is to understand the evolution and natural history ...

Introducción a la miasis | Museo de Historia Natural

Definición de la miasis

El término miiasis fue propuesto por primera vez por Hope (1840) para referirse a enfermedades de humanos que se originan específicamente con larvas dipteras, en oposición a las causadas por larvas de insectos en general, scholechiasis (Kirby y Spence, 1815). Hope presentó una tabla de casos de miiasis que incluía varios de Jamaica como resultado de larvas desconocidas, una de las cuales llevó a la muerte. Algunas de las larvas fueron descritas como de una mosca azul no identificada; estas son casi seguramente referencias muy tempranas a la miiasis causada por el gusano del tornillo del Nuevo Mundo, Cochliomia hominivorax (Coquerel).
Desde entonces, ‼️la miiasis se ha definido como la infestación de animales vertebrados vivos con larvas dípteros, que, al menos durante un cierto período, se alimentan del tejido vivo o muerto del huésped, sustancias corporales líquidas, o alimentos ingeridos' (Zumpt, 1965). ‼️‼️Hay dos sistemas principales para categorizar la miiasis: anatómicamente, en relación con la ubicación de la infestación en el huésped (ver Tabla 1); o según el nivel de dependencia del parásito del huésped (ver Tabla 2).‼️
El sistema anatómico de clasificación fue propuesto por primera vez por Bishopp ( Patton, 1922 ) y luego modificado por James ( 1947 ), ( ver Tabla 1 ). El sistema es útil para el diagnóstico práctico ( Zumpt, 1965 ) y, por lo tanto, se usa a continuación. Sin embargo, Patton ( 1922 ) encontró que no era satisfactorio al considerar las relaciones evolutivas y biológicas, porque las especies individuales podrían asignarse a más de un grupo y diferentes grupos contenían especies con diferentes niveles de dependencia del huésped. En su lugar, ‼️presentó un sistema basado en el grado de parasitismo mostrado por la mosca ( ver Tabla 2 ).‼️

Tabla 1. Clasificación de miias según su posición anatómica en o sobre el animal huésped ...
En la categorización de Patton, hay dos grupos principales de especies causantes de miiasis: los parásitos específicos, que deben desarrollarse en huéspedes vivos; y los parásitos semi-específicos, que generalmente se desarrollan en materia orgánica en descomposición, como carroña, heces y vegetación podrida, pero también pueden depositar sus huevos o larvas en huéspedes vivos. ‼️Zumpt (1965) denominó obligatorios los parásitos específicos y facultativos los parásitos semiespecíficos.‼️ Las especies facultativas pueden diferenciarse aún más dependiendo de si son capaces de iniciar la miiasis (especies primarias) o solo invadir después de que otras especies la hayan iniciado (especies secundarias y terciarias) (Kettle, etc, 1984), (véase el cuadro 2).

Tabla 2. Clasificación de miias según la relación parasitaria de los Diptera con el huésped ...
Además, Patton (1922) definió un tercer grupo de especies causantes de miiasis, aquellas que causan miias accidentales cuando sus huevos o larvas son ingeridos por el huésped. Zumpt (1965) denominó estas pseudomiasis.
Las moscas que se pueden encontrar en casos de miiasis cutánea pertenecen principalmente a cuatro familias, Calliphoridae, Sarcophagidae, Muscidae y Oestridae. Las tres primeras familias están involucradas principalmente en miiasis traumática o herida.

Herida o miiasis traumática

El propósito principal para desarrollar esta clave de identificación es ayudar a ‼️identificar casos de miiasis traumática causada por las tres especies principales de parásitos obligados que se encuentran en la miiasis de la herida.‼️ La mosca del gusano del tornillo del Nuevo Mundo, Cochliomia hominivorax, la mosca del gusano del Viejo Mundo, Crisomya bezziana, y la herida de Wohlfahrt, la miiasis, vuela, Wohlfahrtia magnifica.
‼️La herida o miasis traumática es la infestación por larvas dipteras de principalmente los tejidos cutáneos en animales y humanos,‼️ por lo general, en los sitios de aberturas naturales...
https://www.nhm.ac.uk/research-curation/scientific-resources/taxonomy-systematics/myiasis-larvae/intro-myiasis/